OETDK.

Bevezetés: A gyógyszerfejlesztésnek alap pillérét képezik a klinikai vizsgálatok, melyekben szervezeti egységünk a betegek érdekeit szem előtt tartva már több évtizede szerepet vállal. Fontos a vizsgálatban résztvevők elégedettségének, véleményének vizsgálata, mely értékes betekintést, illetve visszacsatolást nyújt az egészségügyi rendszer-alapú klinikai vizsgálatokkal kapcsolatban.Célkitűzés: A kutatás célja feltérképezni a klinikai vizsgálatokban résztvevők véleményét, motivációját és tapasztalatait. Továbbá szeretnénk megvizsgálni a klinikai vizsgálatban résztvevők véleményét és tapasztalatait a rutin ellátással összehasonlításban. Kontroll csoportként a szakellátásban gondozott betegeink véleményét is felmérjük.Betegek és módszerek: A kitűzött céloknak megfelelő kérdőív került összeállításra, melynek kitöltése önkéntes alapú és anonimizált. A kérdőívek a Reumatológiai és Immunológiai Klinika szakrendeléseire vagy studys vizit-re érkező betegek körében kerültek kiadásra. Vizsgálatban összesen 129 kérdőív (61 studys, 68 kontroll) kiértékelése történt. A statisztikai értékelésnél a p-érték 0,05 alatt volt szignifikáns.Eredmények: A vizsgálatban túlnyomorészt arthritis psoriaticas klinikai vizsgálatban részt vevők kerültek be, ami tükrözi a klinikán jelenlegi/múltbéli vizsgálatokat, illetve studys beteganyagot. A studys csoport többségében nem hallott klinikai vizsgálatokról korábban, 1 vizsgálatban vesz/vett részt és további vizsgálatokra is nyitottak. Vizsgálatban való döntés meghozatalában az új gyógyszer elérhetősége, gyakoribb, szorosabb kontroll, szakrendelésen nem elérhető vizsgálatok, kevés terápiás lehetőség betegségre, illetve leginkább a kezelőorvos javaslata, bele fektetett bizalom befolyásolta leginkább a betegeket, míg a hozzátartozó véleménye nem volt markánsan befolyásoló tényező. Elégedettek voltak a felvilágosítás és rendelkezésre álló idő mértékével és a szakrendelésekkel összehasonlításban jobbnak ítélték meg a studys viziteket több szempontban is. A kontroll csoportban a betegek elégedettek voltak a szakrendelésen való ellátás minőségével.Következtetés: A betegek véleménye tükrözi azt, hogy a studys vizitek alkalmával több idő jut egy betegre, és szélesebb körű ellátás biztosított. A klinikai vizsgálattal kapcsolatban nagyon pozitív visszajelzések érkeztek a betegek részéről. Azon betegek, akik a sreening alkalmával nem kerülhettek a vizsgálatba csalódottak voltak, de számukra kezelőorvos gyorsan talált más terápiás lehetőséget.

Témavezető: Dr. Bodnár Nóra

A menopauza több ezer nőt érint a világon. A tünetek közé tartozik a szív és érrendszeri megbetegedések, csontritkulás, hőhullámok, hüvelyszárazság, csökkent libidó. Nincs jelenleg a piacon egy olyan készítmény, amely teljeskörű megoldást kínál a problémára. Emiatt kutatásaink egy olyan hormontartalmú hüvelyi film fejlesztésére irányultak, mely alkalmas a menopauza alatti ösztrogénhiány pótlására és az akut tünetek kezelésére. Célunk egy hüvelyi film fejlesztése, amely ciklodextrin polimerrel alkotott komplex formájában pótolja az ösztrogént és összetétele miatt alkalmas az akut tünetek enyhítésére is. Továbbá alkalmas applikátorral való adagolásra.Elsőlépésben QbD irányelvet követve meghatároztuk a kívánt termék tulajdonságait és a kritikus paramétereit, ez követően Box-Behnken faktoriális kísérlet tervezéssel optimalizáltuk az összetételeket. Kritikus paraméterekként tűztük ki a filmeknél a homogenitás, szakítószilárdság, szétesési idő, pH és nedvességtartalom vizsgálatát. A komplex kapacitását HPLC-vel mértük, míg a komplexképződést pedig FTIR-rel bizonyítottuk.Eredményeink alapján 1 mg CD-polimerbe 11,8 µg ösztrodiolt kompelxáltunk, melyet HPLC méréssel igazoltunk. Az FTIR görbék az ösztradiol csúcs eltolódásaival megerősítették a komplexképződést. A kísérlettervezés alapján lineáris összefüggést kaptunk a homogenitásnál a filmbe juttatott ZnSO4 és pektin függvényében. A szakítószilárdság szintén lineáris összefüggést adott a PEG400 és hialuronsav esetében. A szétesési időnél azonban kutatócsoportunk másodfokú összefüggést figyelt meg a pektin és hialuronsav esetében és szintén lineárist a ZnSO4-nál. A film összetételét optimalizálva a következő mennyiségeket kaptuk: 20 mg pektin, 1 mg ZnSO4, 50 mg hialuronsav, 12 mg tejsav, 300 µg β-CD polimer-ösztradiol komplex, 10 mg PEG400. Összegezve sikeresen létrehoztunk egy hüvelyi filmet, amely a menopauza során észlelhető akut tünetek kezelésére szolgál, illetve az ösztrogénhiányt pótolja. A készítmény megfelel a vele szemben támasztott elvárásoknak a méréseink alapján. További terveink közé tartozik egy szabadalmaztatható applikátor fejlesztése, illetve ex vivo és in vitro vizsgálatok.

Témavezető: Dr. Haimhoffer Ádám

Vaginális applikátor fejlesztése filmek bejuttatásáraA világ egyik vezető egészségügyi problémája a menopauza. Jellemzően 52 éves kor körül jelentkezik a nőknél és 2030-ra 1,2 milliárdra fog emelkedni a tünetekben érintettek száma. A nők életük akár egyharmadában is szenvedhetnek a kórképtől, melyek közé tartoznak a hőhullámok, hüvelyszárazság, valamint a csökkent libidó, hangulatingadozás és depresszió. A problémát tovább nehezíti, hogy a jelenleg forgalomban lévő hüvelyi termékek csak rendkívül kis százaléka rendelkezik applikátorral, annak ellenére hogy jelentősen növelik a beteg compliancet, továbbá a globális gyógyszercégek fejlesztések kis hányadában fordítanak rá figyelmet.Kutatásunk első lépéseként egy 33 kérdésből álló felmérést készítettünk, amely a menopauza idején a női hüvelyt érintő kezelésekre fókuszált. Ezt követően elvégeztük az applikátor számítógépes modellezését, majd 3D nyomtató segítségével kinyomtattuk. Textúra analizátorral mértük az applikátor test rugalmasságát. Ezután előzetes kísérleteink alapján egy modell filmet is kifejlesztettünk, melynek szakítószilárdságát textúra analizátorral mértük. A filmet tartalmazó kapszula lezárását indukciós hegesztéssel végeztük el, melyről microCT-s felvételeket készítettünk. Az applikátor alkalmazhatóságához kapcsolódó vizsgálatként lemodelleztük a film kilökődését a kapszulából, illetve a gélesedési folyamatot is nyomon követtük.A reprezentatív felmérésünkből kiderült, hogy a kitöltők csaknem 95%-a elégedetlen volt az általuk korábban használt hüvelyi applikátorral, és előnyben részesítenének egy újabb gyógyszerforma kipróbálását a régivel szemben. Az applikátor nyomtatása során buborékmentesen, egyenletesen sikerült kinyomtatnunk az előzőleg megtervezett testeket. Az applikátor test rugalmassága ideálisnak bizonyult, a Young-modulus 2 alatt maradt. A modellfilm szakítószilárdsága 50 N volt, mely a hasonló filmek között rendkívül nagynak számít. Az indukciós hegesztéssel sikeresen lezártuk a filmet tartalmazó kapszulát, ezzel nagymértékben növelve a termék felhasználhatósági idejét. A mikroCT-s felvételek kimutatták, hogy a film törésmentesen, spirális alakban helyezkedik el a kapszulán belül. A film kilökődése sikeres volt, kevés folyadékban gélesedett, majd 5 perc alatt szétesett.Összefoglalva, sikeresen kifejlesztettünk vevői igények alapján egy szabadalmaztatható applikátort, mely alkalmas hüvelyi filmek bejuttatására, amik alkalmasak akut és hormonális problémák kezelésére is.

Témavezető: Dr. Haimhoffer Ádám

Psoriasis is a chronic, immune-mediated inflammatory skin disease characterized by raised, inflamed, scaly patches that can be itchy and even painful. Among the current therapeutic options, topical agents remain a cornerstone for patients with mild-to-moderate plaque psoriasis. Roflumilast is a selective phosphodiesterase-4 (PDE-4) inhibitor that has recently been approved by the FDA for topical use in the case of plaque psoriasis. Its exact mechanism of action remains not fully understood yet, but it likely provides some anti-inflammatory effects.This study aimed to formulate and evaluate Roflumilast. Two gel compositions were prepared with and without hydroxypropyl-beta-cyclodextrin (HPBCD) using ultrasonication at the end. Physicochemical characterization included pH measurement, rheological analysis, particle size analysis, and in vitro drug-release studies were evaluated.Both nanogels demonstrated pH values compatible with the pH of healthy skin. Rheology testing confirmed shear-thinning behavior, which is suitable for topical application. Particle size analysis showed that the HPBCD-containing formulation produced significantly smaller particles compared with the non-HPBCD gel. In vitro release testing indicated enhanced drug release in the HPBCD formulation, consistent with improved solubility and reduced particle size.In conclusion, Roflumilast nanogels were successfully formulated and demonstrated suitable physicochemical properties for topical use. The incorporation of HPBCD reduced particle size and enhanced the drug release, while facilitating the formulation process.

Témavezető: Dr. Pető Ágota

Synthesis of mannobioside containing 1,4-thio linkage for lectin binding studiesName: Agara Miriam SuderSupervisor: Erika Hevesi-MezőDepartment of Pharmaceutical Chemistry, Faculty of PharmacyINTRODUCTION:Lectins are carbohydrate-binding proteins with high specificity for sugars such as mannose. They act as selective “sugar-recognition tools,” binding to carbohydrates on cell surfaces especially red blood cells without modifying them. Because of this, they play key roles in cell communication and immune responses. Lectins occur in plants, animals, and microorganisms and are classified by the sugars they bind or by structural families. For example, C-type lectins require calcium and can recognize multiple sugars, while P-type lectins specifically bind mannose-6-phosphate.AIM:This research aims to synthesize a mannobioside disaccharide composed of two mannose units connected through a 1,4-thio linkage. The synthesis involves preparing suitable glycosyl donors and acceptors from α-D-mannose and α-Me-D-mannopyranoside, using an orthogonal protecting-group strategy to introduce sulfur at positions 1 and 4. After glycosylation and deprotection, the product will be tested in lectin-binding studies to evaluate how the thioether bridge affects carbohydrate lectin interactions. Replacing oxygen with sulphur increases resistance to enzymatic degradation and may influence molecular flexibility, which can be important for binding and for designing glycomimetic probes.MATERIALS AND METHODS:In planning the synthesis, forming the equatorial glycosidic bond was a major challenge when using mannose donors. Two glycosyl acceptors and one donor (SPH-protected) were prepared. The donor was activated by oxidation, followed by SPH removal using DTBMP. The resulting molecule (methyl 3-O-tert-butyldiphenylsilyl-2-deoxy-2-(phenylthio)-α-D-mannopyranoside) was converted to the triflate using trifluoromethanesulfonic anhydride, after which coupling with the thiol was attempted. However, acetal cleavage occurred, giving a complex reaction mixture.RESULTS:No isolable product was obtained, but MALDI-MS allowed prediction of possible structures, and NMR helped assess their correctness. The reaction is ongoing, and alternative strategies are being explored to obtain the desired thio-linked mannobioside.References:[1] I. Bucior, M. M. Burger, Curr. Opin. Struct. Biol., 2004, 14(5), 631-637[2] S. Elgavish, B. Shaanan, Trends Biochem. Sci., 1997, 22(12), 462-467[3] M. W. Turner, Mol. Immun

Témavezető: Dr. Hevesi-Mezo Erika

Cyclodextrins (CD) are cyclic oligosaccharides used in drug delivery systems to improve the drug solubility by the formation of host-guest complexes. This study focuses on Fluorouracil (5-FU) and employs a new approach where the fluorouracil was not inserted into the CD cavity but instead it was chemically conjugated on the outer surface of cyclodextrin by using specific linkers and bonds. 5-FU use nucleoside transporter however, the larger CD-FU conjugates enter cells via macropinocytosis, where the chemical linker is degraded and 5-FU is released into the cell. This approach may enable more control and enhance targeting. To investigate the antiproliferative effects of fluorouracil when it is chemically conjugated to cyclodextrins using different types of linkers and bonds. We aim to explore how the use of different linker lengths and bond could influence the antiproliferative effect and potentially enhance drug delivery compared to the free 5-FU. Conjugates synthesized in Charles University, Prague were assessed on two human colorectal cell lines, HCT-116 and Caco-2 cell lines. Cytotoxicity was evaluated using MTT assay then statistical evaluation was done using GraphPad Prism 10.3.1 software. Pure FU showed a clear dose response. Native CDs and amide only conjugates showed no effect on the cell viability. Conjugates containing an ester bond showed improvements in the antiproliferative effect dependent on linker length. The results of this study showed that the linker composition plays a crucial role in determining the antiproliferative effects of the conjugates. The ester containing linkers showed better effect than those containing the amide bonds. The longest adipoyl linker showed the best activity compared to the shorter succinyl and glutaryl linkers. On the HCT-116 cell line no derivative showed a statistically significant difference with the FU showing the highest activity. On the Caco-2 cell line FU-adip-BCD showed a statistically lower IC50 value compared to the FU, making it the most promising derivative.

Témavezető: Dr. Fenyvesi Ferenc